细胞培养与耐药性验证
尊龙凯时提供的BIU-87/DDP人膀胱癌顺铂耐药细胞,由上海淳麦生物科技有限公司提供,经过体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法的诱导,确保细胞对顺铂的耐药性稳定。培养条件为:90% DMEM(高糖)+ 10% 胎牛血清(FBS)+ 1% 双抗,环境设置在37℃和5% CO2,传代比例为1:2,液体更换间隔为2-3天。
耐药性检测
耐药性检测采用MTT法测定IC50,计算耐药指数(RI=耐药细胞IC50/亲本细胞IC50),并通过形态学观察、生长曲线分析及分子标志物检测(如P53、Myc等表达)进行验证。
质量控制与技术支持
上海淳麦生物提供细胞活性检测(台盼蓝染色)、支原体污染检测(荧光法)及完整的技术指导,以确保实验的可重复性。
案例分析
案例1:As2O3诱导凋亡研究
实验设计使用4μmol/L As2O3处理BIU-87细胞,通过MTT法、DNA合成抑制率及TUNEL检测凋亡率。结果显示显著抑制细胞增殖(P<0.05),并下调抗凋亡基因bcl-2的表达,证实As2O3通过多途径诱导凋亡。
案例2:芹菜素抑制增殖与凋亡机制
实验方法采用2203μmol/L芹菜素处理72小时,使用流式细胞术检测G2/M期阻滞及凋亡率,RT-PCR分析Survivin mRNA表达。数据显示,Survivin蛋白表达下降(P<0.05),Caspase-3活性显著升高(P<0.01),揭示芹菜素通过调控凋亡通路发挥作用。
案例3:复方苦参注射液抗肿瘤效果
动物模型研究显示,复方苦参注射液(7005μg/ml IC50)显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达43.84%,并延长裸鼠存活时间至69天(对照组54天)。
基础研究与转化医学
耐药机制探索
BIU-87/DDP细胞株已被用于研究顺铂耐药相关基因(如Myc、ras)及其信号通路(如TGF-β、u-PAR受体)。尊龙凯时的药物筛选平台支持新型化疗药物的体外筛选,为药物开发提供重要依据。
联合治疗方案开发
结合顺铂与天然化合物(如芹菜素),通过逆转耐药性来提高疗效,同时该细胞株在裸鼠中可形成高分化腺癌,为体内药效评价提供可靠工具。