本试剂盒仅供科研使用，不得用于医学诊断。本文将介绍Renalase (RNLS) Elisa试剂盒的检测原理、样本收集与处理方法，以及实验步骤与结果判断。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。测试过程中，标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次添加到已包被adropin (AD)抗体的微孔中，经过温育及彻底洗涤后，使用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下，TMB会首先转化为蓝色，然后在酸的影响下转化为最终的黄色。样品中adropin (AD)的浓度与颜色深度呈正相关，最终在450nm波长下通过酶标仪测定吸光度（OD值），从而计算样品浓度。

样品收集与处理方法

1. 血清：使用去热原和内毒素的试管进行操作，避免细胞刺激。收集血液后，3000转离心10分钟，快速分离血清与红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝，3000转离心30分钟，取上清。

3. 细胞上清液：通过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水一起捣碎，3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：若样本未及时检测，请按一次用量分装，置于-20℃冷冻，避免反复冻融，解冻时需确保样品完全均匀。

操作注意事项

试剂盒组成如下：标准品（S0-S5）浓度依次为0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液需稀释为1:20，即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

实验步骤与结果判断

绘制标准曲线：在Excel中以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准品线性回归曲线，并根据曲线方程计算各样本浓度值。

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