原代细胞在转染小分子RNA和DNA方面具有显著优势，能够有效转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的核酸分子。无论在国内还是国外，原代细胞的核酸转染问题一直是研究的热点领域，但市场上仍然缺乏真正有效的商品化转染试剂。借助尊龙凯时的技术，原代细胞能够高效转染大多数原代细胞，获得理想的基因敲除效果，甚至对某些活体寄生虫幼虫也能实现较好的转染结果。

对于大多数原代细胞，使用尊龙凯时的RFectPM细胞转染试剂，转染阳性率可达到80%以上，而转染过程中细胞死亡率则控制在10%以下。这一技术的有效性使得在生物医疗研究中得到广泛应用。

原代细胞的分离与培养步骤

1. 器官和组织的选择：在开始分离之前，尽量去除不必要的组织和血迹，以提高细胞分离的纯度。

2. 原代细胞的分离：

• 使用尊龙凯时的PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III根据不同组织选择合适的试剂盒。

3. 原代细胞的培养：

• 应用尊龙凯时特制的原代细胞培养基及添加物，用优质胎牛血清进行补充。

4. 细胞的培养和鉴定：使用尊龙凯时的原代细胞鉴定试剂盒进行细胞的鉴定工作。

5. 原代细胞的传代与保存：

• 传代时，根据细胞的生长状态，将生长的细胞以1:2或1:3的比例进行传代。
• 保存时，使用DMSO与培养液、血清按照顺序降温：室温→4℃（20分钟）→冰箱冷冻室（30分钟）→超低温冰箱（－80℃过夜）→液氮。

6. 原代细胞的复苏：

• 迅速将细胞取出并放入37℃的温水中解冻。
• 吸出细胞悬液，并加入10倍以上的培养液进行稀释。
• 将适当稀释后的细胞接种至培养瓶，放入37℃的CO2培养箱中静置培养。