细胞转染是一种将外源遗传物质引入目标细胞的技术，在生命科学、药物研发和新药开发等领域中起着至关重要的作用。化学转染法是最常用的转染技术，通过控制化学物质的浓度、作用时间等因素，能够精准调节转染效率与时效。

选择转染试剂的策略

选择合适的转染试剂是确保细胞转染实验成功的关键。市面上转染试剂种类繁多，转染效果也不尽相同，以下是一些选择原则：

1. 根据实验目的

首先需要根据实验的需求来选择稳定转染或瞬时转染。稳定转染通常需要使用具有复制能力的质粒或病毒载体，而瞬时转染则不需要。稳定转染常用脂质体试剂，细胞通过内吞作用获取转染，而瞬时转染则通常使用纳米聚合物类试剂。

2. 根据细胞种类

不同细胞对转染效率有显著的影响。例如，HEK293T细胞易于转染，且对载体的选择性较低，广泛应用于功能性蛋白和抗体的开发。而肿瘤细胞如肝癌细胞（HepG2、HUH7）和其他一些原代细胞则面临较低的转染效率。因此，针对不同细胞类型选择相应的转染方法是非常重要的。

3. 根据基因种类

转染通常涉及DNA和RNA。DNA转染主要用于基因表达与蛋白质合成，而RNA转染则用于导入干扰RNA，研究特定基因功能。需要注意的是，一些RNA转染试剂在DNA转染中效果不佳，反之亦然。而且，随着DNA载体大小的增加，转染难度也显著提升。

4. 根据转染效果

优秀的转染试剂应具备高转染效率与低细胞毒性，这样才能确保更多外源基因顺利导入细胞并提高细胞存活率。目前，很多脂质体转染试剂的细胞毒性较高，造成细胞死亡率通常在15%~30%之间，而细胞死亡率控制在15%以下的转染试剂更具市场竞争力。

5. 根据操作简便性

选择操作简便且省时的转染试剂，能够大幅节省实验时间成本。操作简便性包括转染前后是否需要更换培养基、转染试剂的组分数量、孵育方式以及是否需要稀释核酸溶液等。操作简便的转染试剂在多组平行对照条件下有明显优势，能有效降低材料成本和时间成本。

推荐转染试剂

尊龙凯时推出的转染试剂系列如1BGPNAM11/BGPNAM11Plus，主要由纳米阳离子聚合物组成，易于与负电荷的核酸结合并成功转染。针对HEK293/293T细胞的转染效率超过95%，并且对CHO-K1、MCF7等细胞也展现出良好的效果。

此外，2LNP30iMate是一款由脂质体介导的转染试剂，适用于多种常规贴壁细胞，其转染效率在HEK293T等细胞中超过90%。而3LNP60iMate则针对常用工程细胞系，具有高转染效率和低细胞毒性。

实验要点

影响转染效果的因素有：

• 抗生素：抗生素对真核细胞无毒，但会增加细胞对转染试剂的通透性，从而影响转染效率。
• 血清：血清会干扰复合物的形成，降低转染效率。
• 细胞状态：使用1~2次传代的细胞可确保细胞活力。
• 细胞密度：不同转染试剂对细胞密度的要求有所不同。
• 核酸质量：高纯度、无污染的核酸更易获得高效转染。

液体更换的必要性

许多转染试剂要求在转染前后更换液体，原因包括血清对转染效果的影响，以及转染试剂本身的细胞毒性，这些因素都会影响细胞的健康和实验结果。

细胞汇合度的判断

观察细胞在培养板上的铺展状态，可以评估细胞的汇合度。细胞在转染过程中的状态直接影响转染效果。

通过合理选择转染试剂，尊龙凯时将助力您的基因工程研究，提升实验效率与成功率。